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上海酶聯生物關于ELISA試劑盒如何保溫,你知道多少?
發布時間:2023-07-17   點擊次數:156次

ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響,即加標本和加酶結合物后,抗原抗體反響的完結需求有一定的溫度和時刻,這一保溫進程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA試劑盒中似不恰當。


1. 為什么ELISA反響總是需求一定時刻的溫育?

ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發生,以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標本,其間的抗原并不是都有平等的和固相抗結合的時機,只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸,這是一個逐步平衡的進程,因而需經擴散才能到達反響的結尾。在這以后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。

   

2. 溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃等。

37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體結合的適宜溫度,在建立ELISA方法作反響動力學研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反響一般在37℃經1~2小時,產品的可達高峰。為加快反響,可進步反響的溫度,有些實驗在43℃進行,但不宜選用更高的溫度??乖贵w反響4℃更為,在放射免疫測定中多使反響在冰箱中過夜,以構成多的沉淀。但因所需時刻太長,在ELISA試劑盒中一般不予選用。

 

ELISA試劑盒保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均選用水浴,可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中,ELISA板底應貼著水面,使溫度敏捷平衡。為防止蒸騰,板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時可讓反響板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA試劑盒應放在濕盒內,濕盒要選用傳熱性良好的資料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規則的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應如此。


無論是水浴仍是濕盒溫育,反響板均不宜疊放,以確保各板的溫度都能敏捷平衡。室溫溫育的反響,操作時的室溫應嚴厲限制在規則的范圍內,規范室溫溫度是指20~25℃,但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。室溫溫育時,ELISA試劑盒只需平置于操作臺上即可。應留意溫育的溫度和時刻應按規則力求準確。為確保這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板一起測定。

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